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内切酶作用及识别序列结构情况概述

发布时间: 2020-04-13  点击次数: 1668次
   内切酶一般从微生物中获取,限制性核酸内切酶的作用实际就是限制酶降解外源DNA,维护宿主遗传稳定的保护机制。自身DNA没有被分解的原因是通过自身DNA甲基化,甲基化是常见的修饰作用,可使腺嘌呤A和胞嘧啶C甲基化而受到保护,即让它们在甲基转移酶的作用下,与甲基发生共价结合。通过甲基化作用达到识别自身遗传物质和外来遗传物质的目的。
  限制性核酸内切酶识别序列的结构情况:
  根据限制酶的结构,辅因子的需求切位与作用方式,可将限制酶分为三种类型,分别是第①型(Type I)、第②型(TypeⅡ)及第③型(TypeⅢ)。
  Type I:
  同时具有修饰及识别切割的作用;另有识别DNA上特定碱基序列的能力,通常其切割位距离识别位可达数千个碱基之远。
  TypeⅡ:
  Ⅱ类中的限制性内切酶在分子克隆中得到了广泛应用,它们是重组DNA的基础。
  只具有识别切割的作用,修饰作用由其他酶进行。所识别的位置多为短的回文序列;所剪切的碱基序列通常即为所识别的序列。是遗传工程上,实用性较高的限制酶种类。
  Ⅱ类酶切割位点在识别序列中,有的在对称轴处切割,产生平末端的DNA片段;有的切割位点在对称轴一侧,产生带有单链突出末端的DNA片段称粘性末端,如EcoRⅠ切割识别序列后产生两个互补的粘性末端。
  TypeⅢ:
  与一型限制酶类似,同时具有修饰及识别切割的作用。可识别短的不对称序列,切割位与识别序列约距24-26个碱基对。
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