PCR仪是利用DNA聚合酶用于扩增特定的DNA的片段,对特定基因做体外大量合成,可以将一段基因复制为原来的百亿至千亿倍。利用酶融合技术,梯度PCR仪可获得更快、更好结果;其可灵活配备96和384孔加热模块并具优异的梯度功能,用于加速实验方案开发。7"高分辨率触摸屏,配备智能向导,帮助您根据实验室条件创建适合的PCR实验方案。
PCR仪的扩增产物出现多条带,这是怎么回事呢?
1.引物用量偏大,引物的特异性不高。应调换引物或降低引物的使用量。
2.循环的次数过多。适当增加模板的量,减少循环次数。
3.酶的用量偏高或酶的质量不好,应降低酶量或调换另一来源的酶。
4.退火温度偏低,退火及延伸时间偏长。应提高退火温度,减少变性与延伸时间,也可采用二种温度的PCR扩增。以2度为梯度设计梯度PCR反应优化退火温度。
5.样品处理不当。
6.Mg2+浓度偏高,因适当调整Mg2+使用浓度。
7.若为PCR试剂盒,也可能时试剂盒本身质量有问题。
8.复制提前终止。使用非热启动的聚合酶时常有发生。冰上准备反应体系或采用热启动聚合酶。
9.反应缓冲液未*融化或未充分混匀。确保反应缓冲液融化*并*混匀。
10.引物特异性差。检查引物特异性或重新设计引物。
11.引物量过多。减少反应体系中引物的用量。
12.模板量过多。质粒DNA的用量应<50ng,而基因组DNA则应<200ng。
13.外源DNA污染。确保操作的洁净。